中性粒細(xì)胞來源于骨髓,與細(xì)胞的吞噬和消化功能有關(guān)。中性粒細(xì)胞分離是實(shí)驗(yàn)室常規(guī)性實(shí)驗(yàn),以下是具體操作內(nèi)容。
試劑與耗材:人淋巴細(xì)胞分離液、RP1640、15ml離心管4支,蜀科低速離心機(jī),棉球,止血帶、碘伏、采血針,5mlEDTA抗凝采血管2支。1ml 槍及槍頭。
分離步驟:
1. 所有試劑恢復(fù)室溫;
2. EDTA抗凝采血管收集人外周血10ml;
3. 分別將5ml外周血加入5ml人淋巴細(xì)胞分離液中(15ml離心管中進(jìn)行);注意動(dòng)作輕柔緩緩加入;
4. 蜀科低速離心機(jī)500g離心,30-35分鐘,室溫;
5. 離心后收集低帶中性粒細(xì)胞,分兩層,層為單核細(xì)胞,第二層為中性粒細(xì)胞;(若離心后分層不明顯則多離心5-10分鐘)
6. 將RP1640用純水稀釋為50%RP1640用于重懸中性粒細(xì)胞,恢復(fù)細(xì)胞活性。(5-10分鐘)
7. 400g離心10分鐘,去上清,收集中性粒細(xì)胞,重懸于RP1640中,細(xì)胞計(jì)數(shù)。
在細(xì)胞分離實(shí)驗(yàn)中,蜀科低速離心機(jī)肩負(fù)重任。蜀科低速離心機(jī)運(yùn)行中可改變參數(shù),操作簡(jiǎn)單、運(yùn)行平衡、性能穩(wěn)定、安全可靠,“TD-5Z臺(tái)式低速多管架離心機(jī)”更曾入選“國(guó)產(chǎn)好儀器”。蜀科低速離心機(jī)廣泛應(yīng)用于,放射免疫、生物化學(xué)、食品衛(wèi)生、環(huán)保等科研領(lǐng)域,選擇選購!
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